DNA 濃度計算機
依 A260 吸光度、稀釋倍數與體積，計算核酸濃度及總質量。
計算核酸濃度
選擇核酸種類，輸入分光光度計讀值與樣品資訊。
關於 DNA 濃度測量
核酸因含有芳香族鹼基，會在 260 奈米附近強烈吸收紫外光。分光光度計測量此吸光度，再由比耳－朗伯定律連結到濃度。本計算機採用實驗室中雙股 DNA、單股 DNA 與 RNA 的慣用換算係數，接著乘上稀釋倍數及樣品體積，呈現濃度與回收總質量。
依慣例，A260 為 1.0 相當於雙股 DNA 濃度 50 微克每毫升、單股 DNA 濃度 33 微克每毫升，或 RNA 濃度 40 微克每毫升。微克每毫升與奈克每微升的數值相等，因此顯示濃度不需額外倍率換算。稀釋後的讀值須乘上稀釋倍數。例如雙股 DNA 樣品稀釋十倍後 A260 為 0.5，原樣品濃度即為 250 奈克每微升。
準確結果仰賴正確的空白校正、乾淨的光學表面，以及落在儀器線性範圍內的讀值。請使用與樣品相同的緩衝液進行空白校正，因為鹽類、pH 及其他成分會影響基線。輕柔混勻樣品並避免氣泡。若吸光度太高，請稀釋後重新測量，並輸入完整稀釋倍數。此倍數為原始濃度除以測量溶液濃度；未稀釋樣品的倍數為一。
A260 本身無法證明樣品純淨。蛋白質、酚、胍鹽、游離核苷酸及混濁度都可能影響紫外光讀值。實驗室常檢視 A260 與 A280、A260 與 A230 的比值，作為整體純度指標。DNA 濃度低或可能有污染物時，螢光染劑分析可提供更佳專一性。所選換算係數也是近似值，特殊寡核苷酸序列可能需要序列專一的消光係數。
總質量結果可用於回收量計算、標準化規劃，或判斷下游實驗可用的材料量。它只是濃度乘以樣品體積，因此假設樣品均勻。進行定序、選殖、轉染或定量 PCR 等敏感應用前，應遵循分析要求，並考慮用不同原理的方法確認濃度。本工具支援快速規劃與清楚的計算，但可靠定量仍需良好的儀器品質及樣品製備。
DNA 濃度計算範例
使用標準換算係數的吸光度計算實例。
| 樣品 | 計算結果 | 方法 |
|---|---|---|
| dsDNA，A260 0.5，稀釋倍數 10，體積 20 µL | 250 ng/µL；總量 5,000 ng | 使用 dsDNA 換算係數 50。 |
| RNA，A260 0.8，稀釋倍數 2，體積 50 µL | 64 ng/µL；總量 3,200 ng | 使用 RNA 換算係數 40。 |
| ssDNA，A260 0.3，稀釋倍數 5，體積 30 µL | 49.5 ng/µL；總量 1,485 ng | 使用 ssDNA 換算係數 33。 |
如何計算 DNA 濃度
- 選擇雙股 DNA、單股 DNA 或 RNA。
- 輸入在 260 奈米測得並完成空白校正的吸光度。
- 輸入稀釋倍數，以及以微升表示的原始樣品體積。
- 按下「計算濃度」，查看濃度與總質量。
DNA 濃度常見問題
為何 DNA 與 RNA 使用不同的 A260 係數？
兩者的結構與平均消光特性不同，相同吸光度不代表相同質量濃度。慣用係數近似反映這些差異，適合例行測量。
應輸入多少稀釋倍數？
輸入原始樣品濃度是測量溶液濃度的幾倍。一份樣品混合九份緩衝液為十倍稀釋，因此輸入 10。
ng/µL 與 µg/mL 的數值相同嗎？
是的，分子與分母都改變一千倍。因此 50 ng/µL 也等於 50 µg/mL。
A260 能區分 DNA 與 RNA 嗎？
不能。兩者都在 260 奈米附近吸光，污染物也可能有貢獻。成分很重要時，請使用純化對照或選擇性螢光分析。
分光光度計讀值超出線性範圍時怎麼辦？
稀釋樣品，使吸光度落在經驗證的範圍內，再重新測量。請納入完整稀釋倍數，讓計算機還原原始濃度。