蛋白質濃度計算器

蛋白質濃度通常以紫外吸光值估算，或透過比色分析與已知標準品比較。A280 測定利用芳香族胺基酸，尤其是色胺酸與酪胺酸的吸收特性。當質量消光係數以毫升每毫克每公分表示時，可依比耳－朗伯定律，將扣除空白後的吸光值除以消光係數及光徑長度，得到以毫克每毫升表示的濃度，再乘上樣品稀釋倍數。 Bradford、二喹啉甲酸及 Lowry 分析法會產生顏色，其吸光值隨蛋白質含量改變。這些方法需要在與未知樣品相同的條件下測量標準曲線。本計算器使用線性方程式：吸光值等於斜率乘以濃度加上截距。移項求解時，先減去截距，再除以斜率，最後乘上稀釋倍數。請輸入迴歸分析得到的斜率與截距，並確保單位能使結果以毫克每毫升表示。若標準品使用其他濃度單位，請一致地換算結果或校正參數。 可靠的定量仰賴實驗品質，而不只是算術。請使用相同緩衝液與試劑進行空白校正，使用乾淨且相容的比色管或微孔盤，並在方法已驗證的範圍內測量。混濁、核酸、界面活性劑、還原劑、螯合劑、脂質及吸收強烈的緩衝液成分都可能造成偏差。不同蛋白質在比色法中的反應也不同。與未知樣品相似的標準品通常能提高可比性；重複測量標準品和樣品則有助於找出移液或儀器變異。 除非讀盤機進行校正，微孔盤光徑通常不是一公分，因此 A280 應使用儀器的有效或校正光徑長度。消光係數必須符合蛋白質、波長及係數定義；不能將莫耳消光係數直接填入要求質量消光係數的欄位。請檢視殘差，避免遠超標準曲線範圍的外插。濃樣品應稀釋後重測，不要依賴線性範圍外的吸光值。本工具僅執行指定計算，不會驗證樣品製備、校正品質、分析相容性或儀器效能。請記錄原始讀值、空白、標準品、稀釋步驟與單位，確保報告濃度具有可追溯性。