Калькулятор ресуспендирования

Рассчитайте объём растворителя для ресуспендирования известного количества в наномолях до заданной микромолярной концентрации.

Ресуспендирование олигонуклеотидов и соединений

Введите количество сухого вещества в наномолях и желаемую концентрацию исходного раствора в микромолях на литр.

Количество сухого вещества (nmol)

Целевая концентрация (µM)

О расчётах ресуспендирования

Ресуспендирование превращает отмеренное сухое вещество в жидкий исходный раствор при добавлении подходящего растворителя. В молекулярно-биологических и химических лабораториях синтезированные олигонуклеотиды, праймеры, зонды, пептиды и небольшие соединения часто поставляются в виде сухого осадка или плёнки с указанием количества в наномолях. Выбор объёма растворителя по желаемой концентрации упрощает дальнейшее дозирование и разведение. Калькулятор использует соотношение: концентрация равна количеству вещества, делённому на объём. Для количества в наномолях и целевой концентрации в микромолях на литр удобная формула такова: объём в микролитрах = количество в наномолях × 1,000, делённое на концентрацию в микромолях на литр. Коэффициент 1,000 согласует метрические приставки. Например, для приготовления 25 nmol при 100 µM требуется 250 µL растворителя. Результат — конечный объём раствора, который обычно приближённо равен добавленному объёму, если вклад сухого вещества пренебрежимо мал. Целевую концентрацию выбирают с учётом дальнейшей работы. Для ДНК-праймеров часто используют исходный раствор 100 µM: простое десятикратное разведение даёт рабочий раствор 10 µM. Однако подходящее значение зависит от схемы анализа, стабильности, растворимости и лабораторного протокола. Очень маленькие объёмы трудно точно дозировать. В таком случае выберите меньшую концентрацию или поэтапное разведение, а не объём ниже надёжного диапазона имеющегося дозатора. Выбор растворителя не менее важен, чем арифметика. Для олигонуклеотидов могут рекомендоваться вода без нуклеаз или подходящий буфер, а для других соединений — определённый водный буфер либо органический растворитель. Соблюдайте указания поставщика по pH, перемешиванию, температуре, защите от света, хранению и замораживанию-оттаиванию. До приготовления убедитесь, что вещество растворимо при выбранной концентрации. После добавления растворителя перемешайте подходящим для вещества способом и дайте достаточно времени для полного растворения. Краткое центрифугирование собирает жидкость со стенок пробирки. Укажите на этикетке название, концентрацию, растворитель, дату приготовления и условия хранения. Расчёт предполагает, что заявленное поставщиком количество в наномолях верно и всё вещество растворяется. Для ответственных количественных работ учитывайте чистоту, содержание воды, солевую форму, выход извлечения и рекомендованную методикой проверку концентрации.

Примеры ресуспендирования

Примеры напрямую переводят наномоли и целевую микромолярную концентрацию в микролитры.

Сухое количество и целевая концентрация	Добавить растворителя	Расчёт
25 nmol при 100 µM	250 µL	Умножьте 25 на 1,000 и разделите на 100.
7.5 nmol при 50 µM	150 µL	Меньшая целевая концентрация требует большего объёма растворителя.
40 nmol при 200 µM	200 µL	Более высокая концентрация уменьшает конечный объём исходного раствора.

Как рассчитать объём ресуспендирования

Найдите количество сухого вещества в наномолях на этикетке или в сертификате поставщика.
Выберите микромолярную концентрацию исходного раствора, подходящую для дальнейшего протокола.
Введите оба положительных значения в указанных единицах.
Нажмите «Рассчитать объём ресуспендирования» и запишите объём растворителя в микролитрах.
Перед приготовлением проверьте совместимость растворителя и реальную точность дозирования.

Вопросы о калькуляторе ресуспендирования

Зачем в формуле коэффициент 1,000?

Он переводит входные значения в наномолях и микромолях на литр в объём в микролитрах. Это следует из метрических соотношений между молями, наномолями, литрами и микролитрами.

Какой растворитель использовать?

Используйте растворитель, рекомендованный поставщиком или протоколом. На выбор влияют растворимость, стабильность, pH, контроль нуклеаз и совместимость с последующими этапами.

Всегда ли 100 µM — лучшая концентрация исходного раствора?

Нет, хотя 100 µM часто используют для олигонуклеотидов. Выбирайте концентрацию, при которой вещество растворимо, стабильно и удобно для нужных рабочих разведений.

Что делать, если рассчитанный объём слишком мал для дозатора?

Снизьте целевую концентрацию, чтобы увеличить объём растворителя, или используйте подходящее поэтапное приготовление. Не считайте дозатор точным ниже указанного рабочего диапазона.

Меняет ли сухое вещество конечный объём?

Расчёт пренебрегает его вкладом в объём, что обычно допустимо для небольшого количества сухого вещества. Для большей точности доводите раствор до заданного конечного объёма, а не просто добавляйте такой объём растворителя.