DNA 농도 계산기

핵산은 방향족 염기 때문에 260 나노미터 부근에서 자외선을 강하게 흡수합니다. 분광광도계가 흡광도를 측정하고 비어-람베르트 법칙이 이를 농도와 연결합니다. 이 계산기는 이중 가닥 DNA, 단일 가닥 DNA 및 RNA에 쓰이는 일반적인 실험실 환산 계수를 적용합니다. 이어 희석 배수와 시료 부피를 곱해 농도와 회수된 총질량을 표시합니다. 일반적으로 A260 값 1.0은 이중 가닥 DNA의 경우 밀리리터당 50 마이크로그램, 단일 가닥 DNA는 밀리리터당 33 마이크로그램, RNA는 밀리리터당 40 마이크로그램으로 간주합니다. 밀리리터당 마이크로그램은 마이크로리터당 나노그램과 수치가 같아 표시 농도에 추가 배율 변환이 필요하지 않습니다. 희석한 측정값에는 희석 배수를 곱합니다. 따라서 열 배 희석 후 A260이 0.5인 이중 가닥 DNA 시료의 원래 농도는 마이크로리터당 250 나노그램입니다. 정확한 결과에는 적절한 바탕 보정, 깨끗한 광학 표면, 기기 선형 범위 내의 측정값이 필요합니다. 염, pH 및 다른 성분이 기준선에 영향을 줄 수 있으므로 시료와 같은 완충액으로 바탕을 보정하세요. 시료를 부드럽게 섞고 기포를 피하세요. 흡광도가 너무 높으면 희석해 다시 측정하고 전체 희석 배수를 입력합니다. 배수는 원래 농도를 측정 용액 농도로 나눈 값이며 희석하지 않았다면 일입니다. A260만으로 시료의 순도를 증명할 수는 없습니다. 단백질, 페놀, 구아니디늄, 유리 뉴클레오타이드 및 탁도가 자외선 측정값에 영향을 줄 수 있습니다. 실험실에서는 A260 대 A280 및 A260 대 A230 비율을 대략적인 순도 지표로 확인하곤 합니다. DNA 농도가 낮거나 오염이 의심되면 형광 염료 분석이 더 높은 특이성을 제공할 수 있습니다. 환산 계수 역시 근사값이며 특이한 올리고뉴클레오타이드 서열에는 서열별 소광 계수가 필요할 수 있습니다. 총질량은 회수량 계산, 정규화 계획 또는 후속 실험에 사용할 수 있는 양의 판단에 활용하세요. 농도에 시료 부피를 곱한 값이므로 시료가 균일하다고 가정합니다. 시퀀싱, 클로닝, 형질 주입 또는 정량 PCR 같은 민감한 실험 전에는 분석 요구 사항을 따르고 다른 원리의 방법으로 농도를 확인하는 것도 고려하세요. 이 도구는 빠른 계획과 명확한 계산을 돕지만, 신뢰할 수 있는 정량에는 기기 품질과 시료 준비가 여전히 필수입니다.