단백질 농도 계산기

A280 흡광도 또는 Bradford, BCA, Lowry 표준 곡선으로 단백질 농도를 계산합니다.

단백질 시료 정량
측정법을 선택하고 바탕값을 보정한 흡광도와 해당 검량 값을 입력하세요.

단백질 농도 측정 알아보기

단백질 농도는 보통 자외선 흡광도 또는 알려진 표준물질과 비교하는 비색 분석으로 추정합니다. A280 측정은 방향족 아미노산, 특히 트립토판과 티로신의 흡수를 이용합니다. 질량 소광 계수가 밀리리터 매 밀리그램 매 센티미터 단위로 주어지면, 비어-람베르트 법칙에 따라 바탕값 보정 흡광도를 계수와 광경로 길이로 나누어 밀리그램 매 밀리리터 농도를 얻습니다. 그 결과에 시료 희석 배수를 곱합니다. Bradford, 비신코닌산, Lowry 분석법은 단백질 양에 따라 흡광도가 달라지는 발색 반응을 이용합니다. 이 방법에는 미지 시료와 같은 조건에서 측정한 표준 곡선이 필요합니다. 계산기는 흡광도 = 기울기 × 농도 + 절편이라는 선형 방정식을 사용합니다. 식을 변형해 절편을 빼고 기울기로 나눈 다음 희석 배수를 적용합니다. 회귀 분석의 기울기와 절편은 결과 농도가 밀리그램 매 밀리리터가 되는 단위로 입력하세요. 표준물질을 다른 농도 단위로 준비했다면 결과 또는 검량 값을 일관되게 환산하세요. 신뢰할 수 있는 정량은 계산뿐 아니라 실험 품질에 달려 있습니다. 같은 완충액과 시약으로 바탕값을 보정하고, 깨끗하고 호환되는 큐벳이나 플레이트를 사용하며, 검증된 분석 범위 안에서 측정하세요. 탁도, 핵산, 계면활성제, 환원제, 킬레이트제, 지질, 강한 흡수를 보이는 완충액 성분은 결과를 왜곡할 수 있습니다. 비색법에서는 단백질마다 반응도 다릅니다. 미지 시료와 비슷한 표준물질은 비교 가능성을 높이며, 표준물질과 시료의 반복 측정은 피펫팅이나 장비의 변동을 보여 줍니다. 마이크로플레이트 광경로는 리더가 보정하지 않는 한 보통 일 센티미터가 아니므로, A280에는 장비의 유효 또는 보정 광경로 길이를 사용하세요. 소광 계수는 단백질, 파장, 계수 정의에 맞아야 합니다. 질량 소광 계수를 요구하는 칸에 몰 소광 계수를 직접 입력할 수는 없습니다. 잔차를 살펴보고 표준 곡선에서 크게 벗어나는 외삽을 피하세요. 고농도 시료는 선형 범위 밖 흡광도에 의존하지 말고 희석해 다시 측정하세요. 이 도구는 지정된 계산만 수행하며 시료 준비, 검량 품질, 분석법 호환성, 장비 성능을 검증하지 않습니다. 보고 농도를 추적할 수 있도록 원시 측정값, 바탕값, 표준물질, 희석 단계, 단위를 기록하세요.

단백질 농도 예시

측정값농도방법
A = 0.8; 계수 1; 광경로 1 cm; 희석 배수 21.6 mg/mLA280
A = 0.6; 기울기 0.25; 절편 0.1; 희석 배수 24 mg/mLBradford 표준 곡선
A = 0.45; 기울기 0.2; 절편 0.05; 희석 배수 12 mg/mLBCA 표준 곡선

단백질 농도 계산 방법

  1. 시료에 사용한 A280 또는 비색 분석법을 선택합니다.
  2. 바탕값 보정 시료 흡광도와 총 희석 배수를 입력합니다.
  3. A280의 경우 해당 질량 소광 계수와 광경로 길이를 입력합니다.
  4. Bradford, BCA, Lowry의 경우 표준 곡선의 기울기와 절편을 입력합니다.
  5. 농도를 계산하고 측정값이 검증된 범위에 있는지 확인합니다.

자주 묻는 질문

어떤 희석 배수를 입력해야 하나요?

원래 시료에서 측정 용액까지의 총 희석 배수를 입력하세요. 희석하지 않은 시료의 희석 배수는 일입니다.

몰 소광 계수를 사용할 수 있나요?

이 질량 계수 칸에는 직접 사용할 수 없습니다. 분자량과 호환 단위를 이용해 환산하거나 몰 농도를 별도로 계산하세요.

표준 곡선 절편을 왜 빼야 하나요?

절편은 농도가 영일 때의 적합 반응값으로, 바탕 신호를 포함할 수 있습니다. 따라서 회귀 직선을 변형할 때 기울기로 나누기 전에 절편을 뺍니다.

Bradford, BCA, Lowry의 계산은 같은가요?

화학 반응과 간섭 특성은 다르지만 선형 표준 곡선을 변형하는 방식은 같습니다. 실제 분석법, 절차, 파장, 플레이트 조건에 맞는 검량 데이터를 사용하세요.

흡광도가 표준 범위를 벗어나면 어떻게 하나요?

외삽하지 말고 검증된 범위에 들어오도록 시료를 희석해 다시 측정하세요. 다시 계산한 결과에는 모든 희석 단계를 합친 배수를 적용하세요.