Zellverdünnungsrechner

Ein Zellverdünnungsrechner bestimmt, wie viel konzentrierte Zellsuspension und Verdünner benötigt werden, um eine gewählte Endkonzentration und ein bestimmtes Endvolumen herzustellen. Dies ist in Zellkultur, Mikrobiologie, Durchflusszytometrie, beim Ausplattieren, Zählen und Vorbereiten von Assays üblich. Eine einheitliche Zelldichte verbessert die Vergleichbarkeit zwischen Wells, Platten, Proben und Versuchstagen. Eine sorgfältige Volumenplanung reduziert zugleich Abfall und Pipettierfehler. Die Berechnung nutzt die Erhaltungsbeziehung C1V1 gleich C2V2. C1 ist die gemessene Ausgangskonzentration, V1 das zu übertragende Volumen der Stammsuspension, C2 die Zielkonzentration und V2 das gewünschte Gesamtendvolumen. Nach V1 aufgelöst ergibt sich die Zielkonzentration multipliziert mit dem Endvolumen, geteilt durch die Ausgangskonzentration. Das Verdünnervolumen ist das Endvolumen abzüglich des übertragenen Stammvolumens. Der Verdünnungsfaktor ergibt sich aus Ausgangskonzentration geteilt durch Zielkonzentration. Die Konzentrationseinheiten müssen übereinstimmen. Beispielsweise können beide Werte in Zellen pro Milliliter, Zellen pro Mikroliter oder einer anderen identischen Konzentrationseinheit angegeben werden. Da sich die Konzentrationseinheiten kürzen, verwenden die berechneten Volumen von Stammsuspension und Verdünner die gewählte Endvolumeneinheit. Ein Ergebnis von 1.00 mL Stammsuspension und 9.00 mL Verdünner bedeutet, dass die fertige Mischung 10.00 mL umfasst. Es bedeutet nicht, dass nach einer ungemessenen Übertragung 9.00 mL hinzugegeben werden sollen. Korrekte Arithmetik kann eine ungenaue Ausgangszählung nicht ausgleichen. Mischen Sie die Suspension vor der Probenahme schonend, aber gründlich, verwenden Sie ein geeignetes Zählverfahren und berücksichtigen Sie die Viabilität, wenn das Protokoll lebende Zellen verlangt. Wählen Sie Pipetten, deren kalibrierter Arbeitsbereich das benötigte Volumen gut abdeckt. Sehr große Verdünnungsfaktoren sind in einem Schritt eventuell unpraktisch, weil das Stammvolumen für zuverlässiges Pipettieren zu klein wird; verwenden Sie stattdessen eine validierte Verdünnungsreihe. Arbeiten Sie aseptisch, verwenden Sie ein kompatibles Medium oder einen geeigneten Puffer, beschriften Sie jedes Röhrchen und mischen Sie jede Zwischenverdünnung vollständig vor dem nächsten Transfer. Dokumentieren Sie tatsächliche Konzentrationen und Volumen im Versuchsprotokoll, damit andere Personen die Herstellung reproduzieren können.