Калькулятор разведения клеток

Рассчитайте объемы исходной суспензии и разбавителя для точной подготовки клеточной концентрации по соотношению C1V1 равно C2V2.

Расчет разведения клеток

Введите концентрации в одинаковых единицах и выберите нужный конечный объем.

Начальная концентрация клеток (cells/mL)

Целевая концентрация клеток (cells/mL)

Конечный общий объем

Единица объема

О расчетах разведения клеток

Калькулятор разведения клеток определяет, сколько концентрированной клеточной суспензии и разбавителя нужно для получения заданных конечной концентрации и объема. Такие расчеты распространены в клеточных культурах, микробиологии, проточной цитометрии, посевах, подсчете клеток и подготовке анализов. Постоянная плотность клеток обеспечивает сопоставимость опытов между лунками, планшетами, образцами и днями, а тщательное планирование объемов уменьшает отходы и ошибки пипетирования. В расчете используется соотношение сохранения C1V1 равно C2V2. C1 — измеренная начальная концентрация, V1 — переносимый объем исходной суспензии, C2 — целевая концентрация, V2 — желаемый конечный общий объем. Чтобы найти V1, целевую концентрацию умножают на конечный объем и делят на начальную концентрацию. Объем разбавителя равен конечному объему за вычетом перенесенного объема исходной суспензии. Кратность разведения равна начальной концентрации, деленной на целевую. Единицы концентрации должны совпадать. Например, оба значения можно задать в клетках на миллилитр, клетках на микролитр или другой одинаковой единице концентрации. Поскольку единицы концентрации сокращаются, рассчитанные объемы исходной суспензии и разбавителя выражаются в выбранной единице конечного объема. Результат 1.00 mL исходной суспензии и 9.00 mL разбавителя означает, что готовая смесь имеет объем 10.00 mL, а не что следует добавить 9.00 mL после переноса неизмеренного количества. Точная арифметика не исправит неточный исходный подсчет. Перед отбором пробы осторожно, но тщательно перемешайте суспензию, используйте подходящий метод подсчета и учитывайте жизнеспособность, если протокол требует живые клетки. Выбирайте пипетки, позволяющие уверенно работать в калиброванном диапазоне. Очень большие разведения за один шаг могут быть непрактичны: объем исходной суспензии становится слишком мал для надежного пипетирования. В таком случае используйте валидированное серийное разведение. Соблюдайте асептику, применяйте совместимую среду или буфер, подписывайте все пробирки и полностью перемешивайте каждую промежуточную смесь перед следующим переносом. Записывайте фактические концентрации и объемы в протокол эксперимента, чтобы другой сотрудник мог воспроизвести приготовление.

Примеры разведения клеток

Сценарий	От начальной концентрации к целевой	Исходная суспензия и разбавитель
Десятикратное разведение культуры	От 1,000,000 до 100,000 cells/mL	1 mL плюс 9 mL
Анализ малого объема	От 500,000 до 50,000 cells/mL	50 µL плюс 450 µL
Двукратное разведение для посева	От 200,000 до 100,000 cells/mL	2.5 mL плюс 2.5 mL

Как рассчитать разведение клеток

Измерьте и введите начальную концентрацию клеток.
Введите более низкую целевую концентрацию в тех же единицах.
Введите нужный общий объем и выберите его единицу.
Выполните расчет и перенесите указанный объем исходной суспензии.
Добавьте указанный объем разбавителя и тщательно перемешайте.

Частые вопросы

Какую формулу использует калькулятор?

Он использует C1V1 равно C2V2, что отражает сохранение числа клеток при разведении. Объем исходной суспензии равен C2, умноженному на V2 и деленному на C1.

Может ли целевая концентрация превышать начальную?

Нет, добавление разбавителя не концентрирует суспензию. Сначала сконцентрируйте клетки подходящим лабораторным методом и повторно измерьте концентрацию, затем используйте этот расчет.

Должны ли совпадать единицы концентрации?

Да. Для правильного сокращения обе концентрации должны иметь одинаковый знаменатель и одинаковую основу подсчета клеток. Если единицы различаются, пересчитайте одно значение до вычисления.

Когда нужно использовать серийное разведение?

Используйте последовательные шаги, если разовый перенос будет ниже надежного диапазона имеющихся пипеток или протокол требует промежуточные стандарты. Полностью перемешивайте каждую ступень перед отбором следующей аликвоты.

Учитывается ли жизнеспособность клеток?

Автоматически — нет. Если целью являются живые клетки, введите начальную концентрацию, уже скорректированную на жизнеспособность. Вместе с результатом укажите методы подсчета и оценки жизнеспособности.