Resuspensionsrechner

Bei der Resuspension wird eine abgemessene trockene Substanz durch Zugabe eines geeigneten Lösungsmittels in eine flüssige Stammlösung überführt. In molekularbiologischen und chemischen Laboren werden synthetisierte Oligonukleotide, Primer, Sonden, Peptide und kleine Verbindungen häufig als trockenes Pellet oder als Film geliefert; die Stoffmenge ist in Nanomol angegeben. Ein auf die gewünschte Konzentration abgestimmtes Lösungsmittelvolumen erleichtert das spätere Pipettieren und Verdünnen. Dieser Rechner nutzt die Beziehung Konzentration gleich Stoffmenge geteilt durch Volumen. Bei Eingaben in Nanomol und Mikromolar lautet die praktische Umrechnung: Volumen in Mikrolitern = Stoffmenge in Nanomol × 1,000 geteilt durch Konzentration in Mikromolar. Der Faktor 1,000 gleicht die Einheitenpräfixe aus. Beispielsweise benötigen 25 nmol für 100 µM ein Lösungsmittelvolumen von 250 µL. Das Ergebnis ist das Endvolumen der Lösung, das bei vernachlässigbarem Volumenbeitrag der Trockensubstanz meist durch das zugegebene Volumen angenähert wird. Die Zielkonzentration sollte zum anschließenden Arbeitsablauf passen. Für DNA-Primer sind 100 µM üblich, da eine einfache zehnfache Verdünnung eine Arbeitslösung mit 10 µM ergibt. Der passende Wert hängt jedoch vom Assaydesign, der Stabilität, der Löslichkeit und dem Laborprotokoll ab. Sehr kleine berechnete Volumina lassen sich möglicherweise nicht genau pipettieren. Wählen Sie dann eine niedrigere Konzentration oder eine stufenweise Verdünnung, statt unterhalb des zuverlässigen Bereichs der vorhandenen Pipette zu arbeiten. Die Lösungsmittelwahl ist ebenso wichtig wie die Rechnung. Für Oligonukleotide werden möglicherweise nukleasefreies Wasser oder geeignete Puffer empfohlen, während andere Verbindungen einen bestimmten wässrigen Puffer oder ein organisches Lösungsmittel benötigen. Beachten Sie die Herstellerhinweise zu pH, Mischen, Temperatur, Lichtschutz, Lagerung sowie Einfrieren und Auftauen. Prüfen Sie vor der Herstellung, ob die Substanz bei der gewählten Zielkonzentration löslich ist. Mischen Sie nach der Lösungsmittelzugabe mit einer geeigneten Methode und lassen Sie ausreichend Zeit für die vollständige Auflösung. Kurzes Zentrifugieren sammelt Flüssigkeit von den Gefäßwänden. Beschriften Sie die Stammlösung mit Identität, Konzentration, Lösungsmittel, Herstellungsdatum und Lagerbedingungen. Die Rechnung setzt voraus, dass die vom Anbieter genannte Nanomolmenge stimmt und sich die gesamte Substanz löst. Bei kritischen quantitativen Arbeiten berücksichtigen Sie Reinheit, Wassergehalt, Salzform, Wiederfindung und die von der Labormethode empfohlenen Konzentrationskontrollen.