重懸計算器

依已知的奈莫耳量與目標微莫耳濃度,計算重懸所需的溶劑體積。

寡核苷酸與化合物重懸
輸入乾燥材料的量(奈莫耳),以及所需儲備液濃度(微莫耳每公升)。

關於重懸計算

重懸是將適當溶劑加入已知量的乾燥材料,配製成液態儲備液。在分子生物學與化學實驗室中,合成寡核苷酸、引子、探針、胜肽及小分子化合物通常以乾燥沉澱或薄膜形式交付,並以奈莫耳標示物質的量。依所需濃度決定溶劑體積,可讓後續移液與稀釋更方便。 本計算器採用濃度等於物質的量除以體積的關係。當物質的量以奈莫耳輸入、目標濃度以微莫耳每公升輸入時,實驗室常用換算為:體積(微升)= 物質的量(奈莫耳)× 1,000 ÷ 濃度(微莫耳每公升)。係數1,000用來換算公制前綴。例如,將25 nmol配製為100 µM,需要250 µL溶劑。結果是最終溶液體積;當乾燥材料所占體積可忽略時,通常可近似為加入的溶劑體積。 目標濃度應依後續實驗流程選擇。DNA引子常用100 µM儲備液,因為簡單十倍稀釋即可得到10 µM工作液,但合適數值仍取決於分析設計、穩定性、溶解度及實驗室流程。計算體積太小時,可能難以準確移液。此時應配製較低濃度,或採取分段稀釋,而非使用低於現有移液器可靠量程的體積。 選擇溶劑與算術同樣重要。寡核苷酸可能建議使用不含核酸酶的水或適當緩衝液,其他化合物則可能需要特定水性緩衝液或有機溶劑。請遵循供應商的處理說明,包括pH、混合、溫度、避光、保存與凍融建議。配製前,先確認材料可在所選目標濃度下溶解。 加入溶劑後,採用適合材料的方法混合,並給予足夠時間完全溶解。短暫離心可收集管壁上的液體。請在儲備液上標示名稱、濃度、溶劑、配製日期及保存條件。計算假設供應商標示的奈莫耳量正確,且所有材料均已溶解。重要定量實驗還應考慮純度、含水量、鹽類形式、回收率,以及實驗方法建議的濃度確認。

重懸範例

以下範例將奈莫耳量與目標微莫耳濃度直接換算為微升體積。

乾燥材料的量與目標濃度加入溶劑計算說明
25 nmol,目標100 µM250 µL將25乘以1,000,再除以100。
7.5 nmol,目標50 µM150 µL目標濃度越低,需要的溶劑體積越大。
40 nmol,目標200 µM200 µL較高濃度可讓最終儲備液體積較小。

如何計算重懸體積

  1. 從供應商標籤或證明文件查找乾燥材料的奈莫耳量。
  2. 依後續實驗流程選擇合適的目標儲備液微莫耳濃度。
  3. 依顯示單位輸入兩個正值。
  4. 選取「計算重懸體積」,記下以微升表示的溶劑體積。
  5. 配製前確認溶劑相容性及實際移液精度。

重懸計算器常見問題

公式為什麼包含係數1,000?

此係數將奈莫耳量與微莫耳濃度輸入值換算成微升體積,直接源自莫耳、奈莫耳、公升與微升之間的公制關係。

應該使用什麼溶劑?

使用材料供應商或實驗室流程建議的溶劑。溶解度、穩定性、pH、核酸酶控制及後續實驗相容性,都可能影響選擇。

100 µM一定是最佳儲備液濃度嗎?

不一定,雖然100 µM常用於寡核苷酸儲備液。請選擇能溶解、保持穩定且方便配製所需工作稀釋液的濃度。

計算出的體積太小,無法移液怎麼辦?

降低目標濃度以增加溶劑體積,或使用適當的分段配製方法。不要假設移液器在低於規定工作量程時仍能保持準確。

乾燥材料會改變最終體積嗎?

計算假設其體積貢獻可忽略,對少量乾燥材料通常合理。更精確的配製應定容至指定最終體積,而不是直接加入相同體積的溶劑。