DNA 浓度计算器

核酸的芳香族碱基使其在 260 纳米附近强烈吸收紫外光。分光光度计测量该吸光度，比尔－朗伯定律则将其与浓度联系起来。本计算器采用实验室中双链 DNA、单链 DNA 和 RNA 的常用换算系数，再乘以稀释倍数及样品体积，报告浓度与回收总质量。 通常，A260 为 1.0 对应双链 DNA 浓度 50 微克每毫升、单链 DNA 浓度 33 微克每毫升，或 RNA 浓度 40 微克每毫升。微克每毫升与纳克每微升在数值上相等，因此显示浓度无需额外的数量级换算。对于稀释后的读数，应乘以稀释倍数。例如，双链 DNA 样品稀释十倍后 A260 为 0.5，则原样品浓度为 250 纳克每微升。 准确结果依赖正确的空白校正、洁净的光学表面，以及处于仪器线性范围内的读数。应使用与样品相同的缓冲液进行空白校正，因为盐、pH 及其他成分会影响基线。轻轻混匀样品并避免气泡。若吸光度过高，应稀释后重新测量，并输入完整的稀释倍数。该倍数等于原始浓度除以测量溶液浓度；未稀释样品的倍数为一。 仅凭 A260 无法证明样品纯净。蛋白质、苯酚、胍盐、游离核苷酸及浑浊度均可能影响紫外读数。实验室常查看 A260 与 A280、A260 与 A230 的比值，作为总体纯度指标。DNA 浓度较低或可能存在污染物时，荧光染料测定能提供更好的特异性。所选换算系数也是近似值，特殊寡核苷酸序列可能需要序列特异的消光系数。 总质量结果可用于回收量计算、归一化规划，或确定可供下游实验使用的材料量。它只是浓度乘以样品体积，因此假设样品均匀。进行测序、克隆、转染或定量 PCR 等敏感应用前，应遵循相应测定要求，并考虑用独立原理的方法确认浓度。本工具方便快速规划并清晰展示计算，而可靠定量仍依赖仪器质量和样品制备。