重悬计算器

根据已知的纳摩尔量和目标微摩尔浓度,计算重悬所需的溶剂体积。

寡核苷酸与化合物重悬
输入干燥材料的量(纳摩尔)及所需储备液浓度(微摩尔每升)。

关于重悬计算

重悬是向定量的干燥材料中加入合适的溶剂,将其配制为液体储备液。在分子生物学和化学实验室中,合成的寡核苷酸、引物、探针、肽及小分子化合物通常以干燥沉淀或薄膜形式交付,并以纳摩尔标注物质的量。根据所需浓度选择溶剂体积,可简化后续移液和稀释。 本计算器使用浓度等于物质的量除以体积的关系。输入纳摩尔量和目标微摩尔浓度时,便捷的实验室换算公式为:体积(微升)= 物质的量(纳摩尔)× 1,000 ÷ 浓度(微摩尔每升)。系数1,000用于协调公制前缀。例如,将25 nmol配制成100 µM溶液,需要250 µL溶剂。结果表示最终溶液体积;当干燥材料的体积贡献可忽略时,通常可近似视为加入的溶剂体积。 目标浓度应根据后续实验流程选择。DNA引物常用100 µM储备液,因为简单的十倍稀释即可得到10 µM工作液,但合适的浓度仍取决于实验设计、稳定性、溶解度和实验室方案。计算体积过小时,可能难以准确移取。此时应配制较低浓度的溶液,或采用分步稀释,而不要依赖低于现有移液器可靠量程的体积。 溶剂选择与计算同样重要。寡核苷酸可能推荐使用无核酸酶水或合适的缓冲液,其他化合物则可能需要特定水性缓冲液或有机溶剂。请遵循供应商的操作说明,包括pH、混匀、温度、避光、储存和冻融要求。配制前,确认材料在所选目标浓度下可溶。 加入溶剂后,采用适合材料的方法混匀,并留出足够时间使其完全溶解。短暂离心可收集管壁液体。为储备液标注名称、浓度、溶剂、配制日期和储存条件。计算假设供应商标注的纳摩尔量准确,且所有材料均已溶解。对于关键定量实验,还应考虑纯度、含水量、盐形式、回收率,以及实验方法建议的浓度验证。

重悬示例

以下示例将纳摩尔量和目标微摩尔浓度直接换算为微升体积。

干燥材料的量与目标浓度加入溶剂计算说明
25 nmol,目标100 µM250 µL将25乘以1,000,再除以100。
7.5 nmol,目标50 µM150 µL目标浓度越低,所需溶剂体积越大。
40 nmol,目标200 µM200 µL较高浓度可使最终储备液体积较小。

如何计算重悬体积

  1. 在供应商标签或证书上查找干燥材料的纳摩尔量。
  2. 根据后续实验方案选择合适的目标储备液微摩尔浓度。
  3. 按显示的单位输入两个正值。
  4. 点击“计算重悬体积”,记录以微升表示的溶剂体积。
  5. 配制前确认溶剂相容性和实际移液精度。

重悬计算器常见问题

公式为什么包含系数1,000?

该系数将纳摩尔量和微摩尔浓度换算为微升体积,直接来源于摩尔、纳摩尔、升和微升之间的公制关系。

应该使用什么溶剂?

使用材料供应商或实验室方案推荐的溶剂。溶解度、稳定性、pH、核酸酶控制及后续实验相容性都会影响正确选择。

100 µM总是最佳储备液浓度吗?

不是,尽管100 µM是寡核苷酸储备液的常用浓度。应选择能充分溶解、保持稳定且便于配制所需工作液的浓度。

计算体积太小,无法移取怎么办?

降低目标浓度以增加溶剂体积,或采用合适的分步配制方法。不要假定移液器在低于其规定工作量程时仍然准确。

干燥材料会改变最终体积吗?

计算将其体积贡献视为可忽略,这通常适用于少量干燥材料。要求更精确时,应定容至指定最终体积,而不是简单加入等体积的溶剂。