Calculadora de ressuspensão

A ressuspensão transforma uma quantidade medida de material seco em uma solução estoque líquida pela adição de um solvente adequado. Em laboratórios de biologia molecular e química, oligonucleotídeos sintetizados, primers, sondas, peptídeos e pequenos compostos costumam chegar como um pellet seco ou filme, com a quantidade informada em nanomols. Escolher o volume de solvente a partir da concentração desejada facilita a pipetagem e as diluições posteriores. Esta calculadora usa a relação concentração igual a quantidade dividida pelo volume. Com a quantidade em nanomols e a concentração desejada em micromolar, a conversão prática é: volume em microlitros = quantidade em nanomols × 1,000 dividida pela concentração em micromolar. O fator 1,000 ajusta os prefixos métricos. Por exemplo, 25 nmol preparados a 100 µM exigem 250 µL de solvente. O resultado é o volume final da solução, normalmente aproximado pelo volume adicionado quando a contribuição volumétrica do material seco é desprezível. A concentração desejada deve atender às etapas seguintes. Uma solução estoque de 100 µM é comum para primers de DNA, pois uma simples diluição de dez vezes gera soluções de trabalho de 10 µM. Porém, o valor adequado depende do desenho do ensaio, da estabilidade, da solubilidade e do protocolo. Volumes calculados muito pequenos podem ser difíceis de pipetar com exatidão. Nessa situação, prepare uma concentração menor ou faça uma diluição em etapas, em vez de usar um volume abaixo da faixa confiável da pipeta disponível. A escolha do solvente importa tanto quanto a conta. Água livre de nucleases ou uma solução tampão adequada pode ser recomendada para oligonucleotídeos, enquanto outros compostos podem exigir um tampão aquoso específico ou solvente orgânico. Siga as orientações do fornecedor sobre pH, mistura, temperatura, proteção da luz, armazenamento e ciclos de congelamento e descongelamento. Confirme que o material é solúvel na concentração escolhida antes de preparar o estoque. Após adicionar o solvente, misture pelo método adequado ao material e aguarde tempo suficiente para a dissolução completa. Uma centrifugação breve pode recolher o líquido das paredes do tubo. Identifique a solução estoque com nome, concentração, solvente, data de preparo e condições de armazenamento. O cálculo pressupõe que a quantidade em nanomols informada pelo fornecedor está correta e que todo o material se dissolve. Em trabalhos quantitativos críticos, considere pureza, teor de água, forma salina, recuperação e qualquer verificação de concentração recomendada pelo método.