Calculadora de diluição celular

Uma calculadora de diluição celular determina quanto de suspensão celular concentrada e de diluente é necessário para preparar uma concentração e um volume finais escolhidos. Esse cálculo é comum em cultura celular, microbiologia, citometria de fluxo, plaqueamento, contagem e preparação de ensaios. Manter a densidade celular uniforme ajuda a comparar experimentos entre poços, placas, amostras e dias, enquanto o planejamento cuidadoso dos volumes reduz desperdícios e erros de pipetagem. O cálculo usa a relação de conservação C1V1 igual a C2V2. C1 é a concentração inicial medida, V1 é o volume da suspensão estoque a transferir, C2 é a concentração desejada e V2 é o volume total final desejado. Isolando V1, obtém-se a concentração desejada multiplicada pelo volume final e dividida pela concentração inicial. O volume de diluente é o volume final menos o volume de estoque transferido. O fator de diluição é a concentração inicial dividida pela concentração desejada. As unidades de concentração devem coincidir. Por exemplo, os dois valores podem ser expressos em células por mililitro, células por microlitro ou outra unidade de concentração idêntica. Como as unidades de concentração se cancelam, os volumes calculados de estoque e diluente usam a unidade selecionada para o volume final. Um resultado de 1.00 mL de estoque e 9.00 mL de diluente significa que a mistura pronta tem 10.00 mL, e não que se deve adicionar 9.00 mL após uma transferência sem medição. Uma conta exata não corrige uma contagem inicial imprecisa. Misture a suspensão suavemente, mas por completo, antes da amostragem; use um método de contagem adequado e considere a viabilidade se o protocolo especificar células viáveis. Escolha pipetas que operem com folga dentro de suas faixas calibradas. Fatores de diluição muito grandes podem ser inviáveis em uma única etapa, pois o volume de estoque fica pequeno demais para pipetar com confiabilidade; use uma diluição seriada validada. Mantenha a técnica asséptica, use meio ou tampão compatível, identifique todos os tubos e misture completamente cada etapa intermediária antes da próxima transferência. Registre as concentrações e os volumes reais no protocolo experimental para que outra pessoa possa reproduzir o preparo.