Calculadora de dilución celular

Calcula los volúmenes de suspensión inicial y diluyente para preparar una concentración celular precisa mediante la relación C1V1 igual a C2V2.

Cálculo de dilución celular
Introduce las concentraciones en las mismas unidades y elige el volumen final deseado.

Acerca del cálculo de diluciones celulares

Una calculadora de dilución celular determina cuánta suspensión celular concentrada y cuánto diluyente se necesitan para preparar una concentración y un volumen finales determinados. Este cálculo es habitual en cultivo celular, microbiología, citometría de flujo, siembra en placas, recuento y preparación de ensayos. Una densidad celular uniforme facilita la comparación de experimentos entre pocillos, placas, muestras y días, mientras que planificar bien los volúmenes reduce desperdicios y errores de pipeteo. El cálculo usa la relación de conservación C1V1 igual a C2V2. C1 es la concentración inicial medida, V1 el volumen de suspensión inicial que se transfiere, C2 la concentración objetivo y V2 el volumen total final deseado. Al despejar V1, se obtiene la concentración objetivo multiplicada por el volumen final y dividida entre la concentración inicial. El volumen de diluyente es el volumen final menos el volumen de suspensión transferido. El factor de dilución es la concentración inicial dividida entre la concentración objetivo. Las unidades de concentración deben coincidir. Por ejemplo, ambos valores pueden expresarse en células por mililitro, células por microlitro u otra unidad de concentración idéntica. Como las unidades de concentración se cancelan, los volúmenes calculados de suspensión y diluyente usan la unidad de volumen final que elijas. Un resultado de 1.00 mL de suspensión y 9.00 mL de diluyente significa que la mezcla terminada tiene 10.00 mL, no que deban añadirse 9.00 mL tras una transferencia sin medir. Una operación aritmética exacta no corrige un recuento inicial inexacto. Mezcla la suspensión con suavidad, pero completamente, antes de tomar una muestra; usa un método de recuento adecuado y considera la viabilidad si el protocolo exige células viables. Elige pipetas que trabajen holgadamente dentro de sus rangos calibrados. Los factores de dilución muy grandes pueden ser poco prácticos en un solo paso porque el volumen inicial resulta demasiado pequeño para pipetearlo con fiabilidad; utiliza una dilución seriada validada. Mantén la técnica aséptica, usa un medio o tampón compatible, etiqueta cada tubo y mezcla bien cada dilución intermedia antes de transferir a la siguiente. Registra las concentraciones y los volúmenes reales en el protocolo experimental para que otra persona pueda reproducir la preparación.

Ejemplos de dilución celular

SituaciónDe concentración inicial a objetivoSuspensión más diluyente
Dilución de cultivo diez vecesDe 1,000,000 a 100,000 cells/mL1 mL más 9 mL
Ensayo de pequeño volumenDe 500,000 a 50,000 cells/mL50 µL más 450 µL
Dilución a la mitad para siembraDe 200,000 a 100,000 cells/mL2.5 mL más 2.5 mL

Cómo calcular una dilución celular

  1. Mide e introduce la concentración celular inicial.
  2. Introduce una concentración objetivo menor en las mismas unidades.
  3. Introduce el volumen total necesario y selecciona su unidad.
  4. Calcula y transfiere el volumen de suspensión inicial indicado.
  5. Añade el volumen de diluyente indicado y mezcla bien.

Preguntas frecuentes

¿Qué fórmula usa la calculadora?

Usa C1V1 igual a C2V2, que conserva el número de células durante la dilución. El volumen inicial es C2 multiplicado por V2 y dividido entre C1.

¿Puede la concentración objetivo superar la inicial?

No, añadir diluyente no concentra una suspensión. Concentra las células mediante un método de laboratorio adecuado y vuelve a medirlas antes de usar este cálculo de dilución.

¿Deben coincidir las unidades de concentración?

Sí. Ambas concentraciones deben usar el mismo denominador y criterio de recuento celular para cancelarse correctamente. Si las unidades indicadas difieren, convierte uno de los valores antes de calcular.

¿Cuándo debo usar una dilución seriada?

Usa pasos seriados cuando una transferencia única quede por debajo del rango fiable de las pipetas disponibles o cuando el protocolo requiera patrones intermedios. Mezcla por completo cada etapa antes de tomar la siguiente alícuota.

¿El cálculo tiene en cuenta la viabilidad celular?

No automáticamente. Si el objetivo son células viables, introduce una concentración inicial ya corregida por viabilidad. Documenta el método de recuento y de viabilidad junto con el resultado.