Calculadora de resuspensión

La resuspensión transforma una cantidad medida de material seco en una solución madre líquida al añadir un solvente adecuado. En los laboratorios de biología molecular y química, los oligonucleótidos sintetizados, cebadores, sondas, péptidos y compuestos pequeños suelen llegar como un sedimento seco o una película, con la cantidad indicada en nanomoles. Elegir el volumen de solvente según la concentración deseada facilita el pipeteo y las diluciones posteriores. Esta calculadora usa la relación concentración igual a cantidad dividida entre volumen. Con la cantidad en nanomoles y la concentración objetivo en micromolar, la conversión práctica es: volumen en microlitros = cantidad en nanomoles × 1,000 dividida entre la concentración en micromolar. El factor 1,000 ajusta los prefijos métricos. Por ejemplo, preparar 25 nmol a 100 µM requiere 250 µL de solvente. El resultado es el volumen final de solución, que suele aproximarse al volumen añadido cuando el material seco aporta un volumen despreciable. La concentración objetivo debe adaptarse al procedimiento posterior. Una solución madre de 100 µM es habitual para cebadores de ADN, pues una dilución de diez veces produce soluciones de trabajo de 10 µM. Sin embargo, el valor adecuado depende del diseño del ensayo, la estabilidad, la solubilidad y el protocolo. Los volúmenes muy pequeños pueden ser difíciles de pipetear con precisión. En ese caso, prepara una concentración menor o realiza una dilución por etapas, en lugar de usar un volumen inferior al rango fiable de la pipeta disponible. La elección del solvente importa tanto como el cálculo. Para oligonucleótidos puede recomendarse agua libre de nucleasas o una solución tampón adecuada; otros compuestos pueden necesitar un tampón acuoso específico o un solvente orgánico. Sigue las instrucciones del proveedor sobre pH, mezcla, temperatura, protección frente a la luz, almacenamiento y ciclos de congelación y descongelación. Confirma que el material sea soluble a la concentración elegida antes de preparar la solución madre. Tras añadir el solvente, mezcla con el método adecuado para el material y espera el tiempo necesario para su disolución completa. Una centrifugación breve permite recoger el líquido de las paredes del tubo. Etiqueta la solución con su identidad, concentración, solvente, fecha de preparación y condiciones de almacenamiento. El cálculo supone que la cantidad en nanomoles indicada por el proveedor es correcta y que todo el material se disuelve. En trabajos cuantitativos críticos, considera la pureza, el contenido de agua, la forma salina, la recuperación y las verificaciones de concentración recomendadas por el método.